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末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)图片
产品货号:
YTB4168
中文名称:
末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)
英文名称:
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
产品规格:
500U|2500U|10kU
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)是一种非模板依赖的DNA聚合酶,可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3'羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。有报道TdT也可以在RNA的3'羟基端加上NTP,但对于RNA的催化活性要弱于DNA。




  • 寡核苷酸或DNA 3'羟基末端标记;
  • DNA末端加尾(DNA tailing);
  • 5'-RACE;
  • 合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。



由大肠杆菌表达,表达基因的来源为小牛胸腺。


一个活性单位是指37℃条件下,60分钟内,催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3'羟基末端中所需的酶量。
酶活性检测条件:200mM potassium cacodylate (pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01% (v/v) Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。


组分500U2500U10kU
TdT(20U/μL)25μL125μL500μL
5×Reaction Buffer0.3mL1.5mL1.5mL×4

保存:-20℃


100mM KAc (pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01% (v/v) Triton X-100 and 50% (v/v) glycerol。


5×Reaction Buffer:
0.125M Tris (pH7.2@25℃),1M potassium cacodylate,0.05% (v/v) Triton X-100,5mM CoCl2。


不含DNA内切酶和外切酶,不含RNase。


  • 70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致TdT失活。
  • 金属离子螯合剂,较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根均对TdT有抑制作用。



  • DNA 3'末端标记:
    • 参考如下表格设置反应体系:
      成分用量
      待标记DNA10pmol of 3'-termini
      5×Reaction Buffer10μL
      [α-32P]-ddATP,~10TBq/mmol(3000Ci/mmol)1.85 MBq(50μCi)
      TdT(20U/μL)1~2μL
      无核酸酶去离子水至50μL
    • 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
    • 37℃孵育20分钟。
    • 70℃孵育20分钟或加入5μL 0.5M EDTA终止反应。
      • 标记的效率和3'羟基末端的类型有关,3'突出末端的标记效率要显著高于3'缩进末端或平末端的标记效率。
  • DNA末端加尾(DNA Tailing):
    • 参考如下表格设置反应体系:
      成分用量
      DNA片断1pmol of 3'-termini
      5×Reaction Buffer4μL
      dATP or dTTP130pmol(20 μCi)
      或dGTP or dCTP(四种中通常只需加入一种)(3000 Ci/mmol)60pmol
      TdT(20U/μL)0.5~1.5μL
      无核酸酶去离子水至20μL
    • 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
    • 37℃孵育25分钟。
    • 70℃孵育25分钟或加入5μL 0.5M EDTA终止反应。
      • 在上述反应条件下,每个3'羟基末端可以加上100-130个dA或dT,或20-30个dC或dG。
  • 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。

相关搜索:末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)TdT酶Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
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